Bez кейворда

Göndərildi: 08.09.2021
Məqalənin müəllifi Adəm Quliyev

Genin kimyəvi təbiəti ortaya çıxanda genetika artıq yetkin bir elm idi. Əslində, Mendelin irsiyyətin əsas prinsiplərini formalaşdırması, genlərin xromosomlar içərisində mövcud olduğunu anlamaqdan belə asılı deyildi. Daha doğrusu, genlərin varlığı yalnız ana və baba və baba nəsillərində mövcud olan xüsusiyyətlərə əsaslanaraq proqnozlaşdırılan tezliklərdə görünən əlamətlərin nəsillərindəki ifadədən irəli gəlirdi. Bu gün, əlbəttə ki, genetika sahəsi, gen tənzimlənməsi ilə bağlı molekulyar tədqiqatlardan, təbii populyasiyalarda allel tezliklərinin analizinə qədər bir çox alt sahələri olan geniş bir araşdırma spektrini əhatə edir. Genetikanın orijinal versiyasını fərqləndirmək üçün ?? Mendel və onun ardıcıllarınınki? sonradan inkişaf edən müxtəlif əlaqəli sahələrdən,"formal" genetika, "ötürülmə" genetikası və ya "klassik" genetika daxil olmaqla bir neçə termin hazırlanmışdır. Transmissiya genetikası, Mendel məlumatlarının əldə edilməsi prosesini ən yaxşı xarakterizə edən xüsusiyyətdən danışdığı üçün ən məlumatlı bir termindir? genotiplərin və fenotiplərin valideynlərdən nəsillərə ötürülməsinin təhlili yolu ilə.

Mendel özü yalnız cinsi yolla çoxalan orqanizmlərdən ötürülmə genetikası ilə bağlı bütün tədqiqatların əsasını təşkil edən üç ümumi xüsusiyyətdən yalnız ikisini formalaşdırmışdır. Onun formulaları iki qanuna kodlaşdırılmışdır. Birinci qanun, müasir dillə desək, hər bir fərdin hər bir genin iki nüsxəsini daşıdığını və bu iki nüsxədən yalnız birinin hər uşağa ötürüldüyünü bildirir. Bu tənliyin digər ucunda bir uşaq hər bir valideyndən bir tam gen dəsti alacaq və bu, hər genin iki nüsxəsini ehtiva edən bir genotipin bərpasına gətirib çıxaracaqdır. Hər bir genin iki nüsxəsini daşıyan fərdlər (və hüceyrələr) "diploid" sayılır.

Mendelin ilk qanunu, diploid fərdlər "haploid" cinsiyyət hüceyrələri istehsal etdikdə işə düşür? sperma yoxsa yumurta ?? hər birinin yalnız bir tam gen dəsti daşıyır. Heyvanlarda yalnız müəyyən bir növ yüksək ixtisaslaşmış hüceyrə ?? "mikrob hüceyrəsi" olaraq bilinən ?? Meyoz adlanan bir proses vasitəsilə diploiddən haploid vəziyyətə çevrilməyə qadirdir. Bu çevrilmənin meydana gəldiyi hüceyrə bölgüsündə, hər genin iki nüsxəsi ayrılacaq və ya ayrılacaqbir -birindən uzaqlaşın və fərqli qızı (və ya qardaş) hüceyrələrinə keçin. Bu hadisə Mendelin ilk qanununun adını verir: "ayrılıq qanunu." Ayrılma yalnız iki fərqli allel ilə heteroziqot olan lokuslardan müşahidə edilə bilər. Ayrılma nəticəsində bir fərdin hüceyrələrinin yarısı bu allellərdən birini, yarısı digərini ehtiva edəcəkdir. Beləliklə, uşaq hər iki alleli bərabər ehtimalla ala bilər. 43

Mendelin birinci qanunu ayrı -ayrı genlərin bir -birindən təcrid olunmuş şəkildə ötürülməsi ilə əlaqədar olsa da, ikinci qanunu fərqli genlərin bir -birinə nisbətlə ötürülmə üsullarını kodlaşdırmaq məqsədi ilə hazırlanmışdır. Müasir baxımdan Mendelin ikinci qanunu, allellərin hər hansı bir lokusdan ayrılmasının başqa bir lokusdan allellərin ayrılmasına heç bir təsir göstərməyəcəyini bildirir. Ehtimal dilində, bu, hər bir seqreqasiya hadisəsinin bütün digərlərindən müstəqil olması deməkdir və bu, Mendelin ikinci qanununun adını verir: "müstəqil çeşid qanunu".

İki fərqli lokusda müstəqil allel çeşidi ?? məsələn, AB?? yalnız Şəkil 7.2-də göstərildiyi kimi A/ a, B/ bformasının genotipi ilə hər ikisində heteroziqot olan bir fərddən müşahidə edilə bilər . Belə bir şəxs tərəfindən istehsal olunan hər bir hüceyrə Alokusundan yalnız bir allel və Blokusundan yalnız bir allel daşıyacaqdır . İki allel bir-birindən asılı olmayaraq əldə edildiyi üçün hər birinin baş vermə ehtimalını sadəcə vuraraq hər hansı bir xüsusi allelik birləşməsinin ehtimalını hesablamaq mümkündür. Məsələn, bir gametin Aqəbul etmə ehtimalıallel 0,5-dir (ayrılma qanununa görə) və eyni eni hüceyrənin balleli alması ehtimalı da 0.5-ə bərabərdir. Beləliklə, bir gametin birləşmiş A bgenotipinə sahib olma ehtimalı 0,5 x 0,5 = 0,25 -dir. Eyni ehtimallar, mümkün olan dörd allelik birləşməsi üçün də alınır ( AB, ab, A b, a B). Bir fərdin istehsal etdiyi gamet sayı çox olduğundan bu ehtimallar birbaşa hər bir gamet növünün mövcud olduğu tezliklərə və öz növbəsində hər birinin nəslə ötürüləcək tezliyinə çevrilir (şəkil 7.2).

Bu gün hamımızın bildiyimiz kimi, Mendelin ikinci qanunu yalnız eyni xromosomda bir -birinə bağlı olmayan genlər üçün keçərlidir. 44 ABgenləri əlaqələndirildikdə, dörd allel dəstinin hər biri üçün gözlənilən rəqəmlər% 25-dən əyri olur (şəkil 7.3). İki allel kombinasiyası valideyn xromosomlarındakı əlaqə tənzimləmələrini təmsil edəcəkdir (məsələn, ABab) və bu birləşmələrin hər biri 25%-dən çox tezliklə ötürüləcəkdir. Qalan iki sinif, 25%-dən aşağı tezlikdə ötürüləcək rekombinant tənzimləmələri təmsil edəcək. Mütləq əlaqənin həddindən artıq vəziyyətində, yalnız iki valideyn sinfi, hər biri 50% tezliklə ötürüləcəkdir. Orta səviyyəli əlaqələrdə, iki valideyn sinifinin birlikdə ötürülməsi% 50-dən çox, lakin 100% -dən az olacaqdır.

1905 -ci ildə, allelləri müstəqil olaraq çeşidlənməyən lokuslar şəklində əlaqəyə dair sübutlara ilk dəfə rast gəlindikdə, onun əhəmiyyəti qiymətləndirilməmişdir (Bateson və digərləri, 1905). Bağlanmaitələməterminləribu qeyri -adi kəşfin səbəbini bir növ əsas fiziki qüvvə hesabına hesablamışlar. 1911-ci il tarixli bir genetika kitabında Punnett, fərqli genlərin allellərinin "bir-birlərini itələyəcəklərini, sanki eyni ziqotaya girməkdən imtina edə biləcəklərini, ya da bir-birlərini cəlb edə biləcəklərini və əlaqəli olduqlarını, eyni hüceyrəyə keçə biləcəyini xəyal etdi. üstünlük verdikləri kimi "(Punnett, 1911). Bu hipotezin izah edə bilmədiyi şey, bir nəsildə bir -birinə itələyən allellərin niyə sonrakı nəsildə bir -birinə bağlana biləcəyidir. Ancaq Punnett -in genetik mətni nəşr olunsa da, bir izahat əlində idi. 1912-ci ildə Morgan və iş yoldaşları birləşmə və itələmənin əslində genlərin eyni xromosomla birlikdə lokalizasiyasının bir nəticəsi olduğunu irəli sürdülər: qoşulmuş allellər eyni valideyn homologunda olanlardır;və itələmədə allellər alternativ homoloqlarda olanlardır (Morgan və Cattell, 1912 və Şəkil 7.3). Bir nəsildə itələyən allellər keçmə prosesi vasitəsilə (məsələnŞəkil 7.3) dəki Aballelləri eyni homoloqda birləşdirilə bilər ?? və beləliklə birləşdi ?? gələcək nəsildə. 1913-cü ildə Sturtevant, Drosophila X xromosomundakı altı genlə ilk əlaqə xəritəsini inkişaf etdirmək üçün müxtəlif lokuslar arasında keçidin baş verdiyi dərəcələrdən istifadə etdi (Sturtevant, 1913). Bu yeni anlayışla birləşmə və itələmə terminlərinin orijinal əsaslandırması ortadan qaldırılsa da, terminlərin özləri genetiklərin (xüsusən də insan genetikləri) dilində saxlanılmışdır. İki əlaqəli lokusdakı allellərin birləşməsinin və ya itilməsinin əlaqələndirmə mərhələsiadlanır .

Bu fəslin məqsədi siçanın müasir tədqiqatlarına tətbiq edildiyi kimi ötürülmə genetikası konsepsiyalarını inkişaf etdirməkdir. Bu müzakirə hərtərəfli olmağı nəzərdə tutmur. Daha doğrusu, genləri siçan əlaqələndirmə xəritəsinə yerləşdirmək istəyən araşdırmaçılara və fərqli heyvanlar və ya ştammlarla fərqli şəkildə ifadə olunan müxtəlif xüsusiyyətlərin genetik əsasını təyin etmək istəyənlər üçün ən çox alman olan xüsusi protokollara və problemlərə toxunacaqdır.

7.2.2 Bağlantı və rekombinasiya

7.2.2.1 Arxa çapraz

Genetikəlaqə birbaşa fizikinəticəsidirdiploid genom daxilində müəyyən bir xromosom homoloq dəstini təyin edən eyni cüt DNT molekulları içərisində iki və ya daha çox lokusun əlaqəsi. Genetik əlaqə siçanlarda araşdırılan hər bir lokusda bir və ya hər iki valideynin heterozigot aşkar edəcəyi təcrübələr vasitəsilə nümayiş etdirilir. Ən sadə əlaqə analizində? backcross kimi istinad edilir ?? yalnız bir valideyn iki və ya daha çox lokusun hər birində heterozigot, digər valideyn isə eyni lokuslarda homozigotdur. Nəticədə, alternativ allellərin ayrılması yalnız bir valideyndən qaynaqlanan gametlərdə baş verir və nəslin genotipləri bu gametlərin allel quruluşunun birbaşa təyin olunmasını təmin edir.Backcross, genetik məlumatların təfsirini xeyli asanlaşdırır, çünki nəslin genotiplərindən heterozigotlu ana tərəfindən fərqli meyotik məhsulların əmələ gəlməsi tezliyinə keçməyə imkan verir.

Arxa cərgədə araşdırılan hər bir lokus üçün, heterozigot valideynlərdən allellərin ayrılmasının hər bir nəsildə təqib oluna bilməsi üçün uyğun heterozigot və homozigot genotipləri seçilməlidir. Klonlaşdırılmamış lokuslar üçün nəslin genotipi yalnız fenotipik analizlə müəyyən edilə bilər. Bu vəziyyətdə, heterozigot valideyndə mövcud olan iki allel tam dominant/resesif bir əlaqə göstərərsə, digər valideyn resesif allel üçün homozigot olmalıdır. Məsələn, Ahalbuki agouti mahal allel, bir sırıqlı "agouti" qat rəng üçün siçan səbəb birallel möhkəm "qeyri-agouti" qat rəng müəyyən edir. -Ci ildən Aallel üçün dominant olan bir, homozigot valideyn a/ a olmalıdır. A / AXA / a backcross ildə agouti nəslini meydana ötürülməsi göstərir ki Aheteroziqot valideyn allel və qeyri-agouti nəslini meydana ötürülməsi göstərir ki , birallel.

Sadəcə təsvir olunan halda, yabanı tipli allel ( A) dominantdır və mutant allel ( a) resesifdir. Beləliklə, homozigot valideyn mutant alleli ( a / a) daşımalı və agouti olmayan bir palto rəngini ifadə etməlidir. Digər hallarda, vəziyyət dominant olan mutasiyalar və resessiv olan vəhşi tip allellər ilə tərsinə çevrilir. Məsələn, Tlokusundakı Tmutasiyası quyruğun dominant qısalmasına səbəb olur. Beləliklə, əgər Tlokusu arxa krossoverə daxil edilsə, heterozigot genotipi T / +və homozigot genotipi vəhşi tipli ( +/ +)olardı.) Tallelinin ötürülməsini (qısa quyruqlu nəsillər daxilində) +alleldən (normal quyruqlu nəsillər daxilində ) ayırmağa imkan vermək .

Fəsil 8-də müzakirə edildiyi kimi, əksər lokuslar indi birbaşa DNT əsaslı üsullarla yazılır. Müəyyən bir lokusdakı hər iki DNT alleli bir-birindən fərqlənə biləcəyi müddətcə, 45 homozigot valideynin ümumi genotipinə daxil olmaq üçün seçilənin heç bir əhəmiyyəti yoxdur. Eyni, allel cütlərinin kodominant və ya natamam dominant bir şəkildə hərəkət etdikləri bütün fenotipik olaraq müəyyən edilmiş lokuslar üçün də keçərlidir. Bütün bu hallarda, heterozigot ( məsələn A 1 /A 2) hər iki homozigotdan ( A 1 /A 1A 2 /A 2) fərqlənə bilər .

7.2.2.2 Məsafələri xəritəyə salın

Şəkil 7.3 -də təqdim olunan nümunədə, bir heyvan iki əlaqəli lokusun hər ikisində heterozigotdur və nəticədə iki tamamlanmış birləşmiş allellər meydana çıxır? ABab. Bu heyvanın genotipi belə yazılacaqdı: AB/ ab. 46 Meyoz zamanı homologlar arasında keçid olmadıqda, bu və ya digər qoşma dəsti ?? ya ABya ab? hər gametə ötürüləcək. Lakin ABlokusları arasında bir krossover hadisəsi baş verərsə , allellərin valideyn olmayan birləşməsi hər bir hüceyrəyə ötürüləcəkdir. Şəkil 7.3 -də göstərilən nümunədə Alokusları arasında rekombinasiya tezliyiB, iki ana olmayan və ya "rekombinant" allel birləşmələrindən birini ehtiva edən gametlərdən əmələ gələn nəslin faizini təyin etməklə birbaşa hesablana bilər. Bu nümunədə rekombinasiya tezliyi 10% -dir.

Birinci dərəcədə, keçid genomdakı bütün xromosomlar boyunca təsadüfi yerlərdə baş verir. Bu təsadüfiliyin birbaşa nəticəsi, bir-birinə bağlı iki lokusun bir-birindən nə qədər uzaq olmasıdırsa, aralarında uzanan xromosom uzunluğunda bir keçid hadisəsinin baş vermə ehtimalı o qədər yüksəkdir. Beləliklə, rekombinasiya tezliyi genetik məsafənin nisbi qiymətləndirilməsini təmin edir. Genetik məsafələr, 1%tezliklə rekombinasiya edən iki lokus arasındakı məsafə olaraq təyin olunan bir centimorgan ilə centimorgans (cM) ilə ölçülür. Beləliklə, başqa bir nümunə olaraq, iki lokus 2,5%tezliklə yenidən birləşərsə, bu, təxminən 2,5 cM genetik məsafəni təmsil edər. Siçanda genetik və fiziki məsafələr arasındakı korrelyasiya bir sentimorganın ortahesabla olduğunu göstərdi, 2000 kilobazaya bərabərdir. Bununla yanaşı, ekvivalentlik nisbətinin Bölmə 7.2.3-də müzakirə olunan çoxsaylı amillərə görə çox fərqli ola biləcəyini bilmək vacibdir.

İki lokus arasında rekombinasiya tezliyi onları ayıran DNT-nin uzunluğu ilə təxminən nisbətdə olsa da, bu uzunluq çox böyüdükdə, tezlik 50% -ə yaxınlaşacaq, bu əlaqəsiz lokuslarla gözləniləndən fərqlənmir. Siçan xromosomunun orta ölçüsü 75 sm -dir. Beləliklə, genlər eyni xromosomda yerləşsə də, terminin rəsmi tərifinə görə mütləq bir-biri ilə əlaqələndirilmir. Bununla birlikdə, bir əlaqə qrupu, birləşmə ilə əlaqəliolan bütün genləri ehtiva edir. Beləliklə, əgər Ageni Bgeninə və Bgeni Cgeninə bağlıdırsa , üç gen birlikdə? ABC?? Qrupun ən uzaq üzvləri bir -biri ilə əlaqə qurmasa belə bir əlaqə qrupu yaradın.

7.2.2.3 Genetik müdaxilə

Əvvəlcə eyni meyotik hüceyrədəki bütün rekombinasiya hadisələrinin bir-birindən müstəqil olması lazım olduğunu düşünmək olar. Bu fərziyyənin birbaşa nəticəsidir ki, rekombinasiya tezliyi ilə genetik məsafə arasındakı xətti əlaqə ?? tək rəqəmli centimorgan aralığında görünür? məsafələrin artması ilə degenerasiya olunmalıdır. Bu dejenerasyonun səbəbi, iki lokus arasındakı məsafə artdıqca aralarında çoxlu rekombinasiya hadisələrinin baş vermə ehtimalının artmasıdır. Təəssüf ki, iki, dörd və ya hər hansı bir cüt sayda keçid meydana gəlsə, nəticədə meydana gələn gametlər, Şəkil 7.4 -də göstərildiyi kimi analiz edilən iki lokusda birləşmiş allellərin ana birləşməsini saxlayacaqdır. İkiqat (dördqat) rekombinantlar qeyri-rekombinantlardan aşkar olunmayacaq dərəcədə fərqlənməyəcəkdir. Nəticə kimi,müşahidə olunan rekombinasiya tezliyi faktiki rekombinasiya tezliyindən az olacaq.

Məsələn, 20 cM həqiqi genetik məsafə ilə ayrılan iki lokusu düşünün. Sadə ehtimal nəzəriyyəsinə görə, bu arada iki müstəqil rekombinasiya hadisəsinin baş vermə ehtimalı, hər birinin tək başına meydana gələcəyi proqnozlaşdırılan tezliklərin məhsuludur və 20 sm məsafə üçün 0,20-dir. Beləliklə, ikiqat rekombinasiya hadisəsinin ehtimalı 0,2 x 0,2 = 0,04-dür. Uğursuzluq iki loci yalnız 20 sm ayrılmış ki gametes vasitələrinin 4% rekombinasiya aşkar etmək üçün göstərmək0,16 tezliyində rekombinasiya. 47 Bənzər bir hesablama 30 cM-də rekombinant məhsulların müşahidə olunan tezliyinin 0,21-də daha da qaldırılacağını göstərir. 1919 -cu ildə Haldane, təsvir edilən formulaya əsaslanaraq bütün xəritə məsafələrində rekombinasiya kəsrləri üçün dəyərlər verə biləcək ümumi bir tənlik hazırlayaraq bu tip hesablamaları sadələşdirdi. Bu tənlik "Haldane mapping funksiyası" kimi tanınan və bu aşkar rekombinant xromosomların (ilə nəslini gözlənilir fraksiyası aid edilir rMorgans faktiki xəritəsi məsafə) ( miki loci (Haldane, 1919) ayıran) 48:

Rekombinasiya nisbətlərinə bu hipotetik düzəliş üzərində işlədikdən sonra, eyni xromosomda çoxlu rekombinasiya hadisələrinin bir -birindən müstəqil olmadığını bildirməyin vaxtıdır. Xüsusilə, bir xromosomda bir mövqedə olan bir rekombinasiya hadisəsi, ətrafındakı digər rekombinasiya hadisələrinin başlanmasına mane olmaq üçün hərəkət edəcək. Bu fenomen uyğun olaraq "müdaxilə" kimi tanınır. Müdaxilə ilk dəfə Drosophila(Muller, 1916) üzərində aparılmış ən erkən əlaqələndirmə tədqiqatlarından əldə edilən məlumatlarda gözləniləndən daha az ikiqat krossoverlərin sayı baxımından müşahidə edildi . O vaxtdan bəri kifayət qədər genetik məlumatların yaradıldığı hər bir daha yüksək ökaryotik orqanizmdə müdaxilə göstərilmişdir.

Məməlilərdə çox uzun məsafələrə əhəmiyyətli müdaxilənin olduğu təsbit edildi. Müdaxilənin ən geniş kəmiyyət təhlili, 17.316 meyotik hadisənin məhsullarında yazılmış insan xromosomunun 9 markerində aparılmışdır (Kwiatkowski və digərləri, 1993). 10 cM aralığında yalnız iki cüt krossover hadisəsi tapıldı; bu müşahidə olunan 0.0001 tezliyi, müdaxilə olmadıqda gözləniləndən 100 qat aşağıdır. 20 cM aralığında 10 cüt keçid hadisəsi baş verdi (yuxarıdakı ikisi də daxil olmaqla); bu müşahidə olunan 0.0005 tezliyi müdaxilə etmədən proqnozlaşdırıldığından hələ də 80 qat aşağıdır. Xəritə məsafələri 20 cM -dən yuxarı artdıqca müdaxilənin gücü azalır, ancaq 50 cM -ə qədər olan məsafələrdə belə təsirləri hələ də müşahidə oluna bilər (Povey və digərləri, 1992). 49

İnsan 9 -cu xromosomunun rekombinasiya xüsusiyyətlərinə görə bənzərsiz olduğunu düşünsək, bu analizin nəticəsi ondan ibarətdir ki, 1000 -dən az insan meyotik hadisəsinin yazıldığı təcrübələr üçün 10 cM aralığında birdən çox krossoverin olması ehtimalı çox azdır və 25 cM ərzində fasilələrlə, hələ də olduqca nadir olacaqlar. Siçandakı ikiqat krossoverləri qiymətləndirən məlumatlar o qədər də geniş deyil, lakin buna bənzər bir müdaxilə olduğunu göstərir (King et al., 1989). Beləliklə, bütün praktik məqsədlər üçün 0,25 və ya daha az olan rekombinasiya fraksiyalarını 100 -ə sadə vurma yolu ilə birbaşa sentimorgan məsafələrinə çevirmək məqsədəuyğundur.

0,25-dən böyük olan rekombinasiya fraksiyaları ilə işləmək lazım olduqda, harita məsafəsinin qiymətləndirilməsinə müdaxiləni daxil edən bir Xəritəçəkmə funksiyasından istifadə etmək faydalıdır. Müdaxilənin təsirləri yalnız empirik olaraq təyin edilə bildiyindən, ilk prinsiplərdən belə bir Xəritəçəkmə funksiyası çıxarıla bilməz.

Bunun əvəzinə, müxtəlif növlərdə müşahidə olunan nəticələrə uyğun tənliklər hazırlanmışdır (Crow, 1990). Ən yaxşı bilinən və ən çox istifadə olunan Xəritəçəkmə funksiyası Kosambi (1944) tərəfindən hazırlanan erkən bir funksiyadır:

Müşahidə rekombinasiya qismini üçün, Equation 7.2 həlli ilə r, bir əldə xəritə məsafə "Kosambi smeta" K m100 Daha sonra vurma vasitəsilə centimorgans çevrilir, Carter və (1951) Falconer bir mapping funksiyası ki, inkişaf siçanda əlaqələndirmə tədqiqatları ilə əldə edilən nəticələrə əsaslanaraq daha da yüksək müdaxilə səviyyəsini nəzərdə tutur: 50

Carter-Falconer Xəritəçəkmə funksiyasının siçan məlumatları üçün ən dəqiq olduğu aydın olsa da, Kosambi tənliyi ucuz, mürəkkəb əllə işləyən kalkulyatorların mövcudluğundan əvvəlki günlərdə daha asan həll olunurdu. Carter-Falconer funksiyası bu gün asanlıqla həll olunsa da, o qədər də məşhur deyil və o qədər də geniş istifadə olunmur.

Müdaxilə iki səbəbdən əlaqələndirmə işləri aparan genetiklərin xeyrinə işləyir. Birincisi, rekombinasiya tezliyi və genetik məsafə arasındakı təxmini xəttlilik, qəti şəkildə müstəqil hadisələrdən gözləniləndən çox uzanmışdır. 51 İkincisi, çoxlu rekombinasiya hadisələrinin çox aşağı ehtimalı, üç lokuslu xaçda düzgün gen sırasını ayırd etmək üçün bir vasitə ola bilər, çünki 20 cM aralığında markerlər arasında ikiqat rekombinant tələb edən hər hansı bir sifariş şübhəlidir. Bütün mümkün gen əmrləri ikiqat və ya üçlü krossover hadisəsi tələb etdikdə, tədqiqatçının geri qayıtması və hadisənin baş verdiyi ehtimal olunan nümunəni və ya nümunələri yenidən təhlil etməsi lazımdır. Nəhayət, genotiplərin doğru olduğu göstərilibsə,tək bir lokusda, onun ətrafındakılardan fərqli bir təcrid olunmuş gen dönüşüm hadisəsinin meydana gəlmə ehtimalını nəzərdən keçirmək lazımdır.

7.2.3 Krossover saytları təsadüfi şəkildə paylanmır

7.2.3.1 İdeal vəziyyətdə olan nəzəri mülahizələr

Genetik müdaxilə, ayrı -ayrı gametlər daxilində krossover hadisələrinin bir -birinə nisbətlə paylanmasının təsadüfi olmasını məhdudlaşdırsa da, çoxlu sayda müstəqil meyotik məhsullarda müşahidə olunan krossover sahələrinin təsadüfi paylanmasına təsir etməyəcəkdir. Beləliklə, əvvəlcədənhələ də bir əlaqə xəritəsinin həllinin genetik bir xaçda yazılan nəsillərin sayı ilə xətti olaraq artacağını gözləmək olardı. Təsadüfi rekombinasiya yerlərini götürsək, bir xaçdan nəsillər arasında müşahidə olunan krossover hadisələr arasındakı centimorgansdakı orta məsafə, sadə bir düstura (100/ N) görə hesablana bilər, burada N yazılmış meyotik hadisələrin sayıdır. Məsələn, 200 meyotik hadisənin təhlilində (200 geri krossoud və ya 100 intercross nəsil), hər 0,5 cM -də orta hesabla bir rekombinasiya hadisəsi müşahidə ediləcək. 1000 meyotik hadisədə, orta məsafə təxminən 200 kb DNT -yə bərabər olan yalnız 0.1 cM olacaq. Bu düstura görə daha da irəli gedərək, 10.000 nəsil ilə, 20 kb -ə yaxın bir genetik qətnamə əldə etmək olardı.Bu, genomdakı orta ölçülü genlərin əksəriyyətini bir-birindən ayırmaq və xəritələmək üçün kifayət edər.

Yenə də faktiki təcrübələrdə əldə edilən nəticələr nəzəri proqnozlarla üst -üstə düşmür. Əslində, rekombinasiya sahələrinin paylanması bir neçə fərqli səviyyədə təsadüfən əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənə bilər. Birincisi, ümumiyyətlə, bütün xromosomların telomerik hissələri həm siçanlarda (de Boer, həm də Groen, 1974) və insanlarda (Laurie və Hulten, 1985) sentromere yaxın olan bölgələrə nisbətən daha çox rekombinojendir. Bu təsir ən çox kişilərdə özünü göstərir və kişi və qadın əlaqə xəritələrini bir-birinə nisbətən istiqamətləndirməyə çalışdıqda rezin bant kimi bir təsirə səbəb olur (Donis-Keller və digərləri, 1987). İkincisi, bütün xromosom boyunca fərqli sahələr az -çox rekombinasiyaya məruz qalır. Üçüncüsü, eyni genomik bölgədə belə,rekombinasiya dərəcələri analiz üçün istifadə olunan hibridin istehsalında istifadə olunan siçanların müəyyən növlərindən asılı olaraq çox dəyişə bilər (Seldin və digərləri, 1989; Reeves və digərləri, 1991; Watson və digərləri, 1992). Nəhayət, hibridin cinsi də rekombinasiya nisbətlərinə dramatik təsir göstərə bilər (Reeves və digərləri, 1991).

7.2.3.2 Rekombinasiya nisbətlərində cinsə xas fərqlər

Rekombinasiya nisbətlərində cinsə xas fərqlər yaxşı məlumdur. Ümumiyyətlə, rekombinasiyanın qadın meyozuna nisbətən kişi meyozu zamanı daha az baş verdiyini söyləmək olar. Bu ümumi qaydanın həddindən artıq nümunəsi Drosophila melanogaster -dəgörülürkişilərdə rekombinasiya tamamilə aradan qaldırılır. Siçan vəziyyətində, kişilərdə rekombinasiya dərəcəsi olan qadınlarda müşahidə edilənlərin orta hesabla 50-85% -ni göstərən vəziyyət o qədər də həddindən artıq deyil (Davisson və digərləri, 1989). Bununla birlikdə, kişi ilə qadın arasında rekombinasiya nisbətləri, siçan genomunun fərqli bölgələri arasında çox dəyişə bilər. Bir neçə bölgədə rekombinasiya nisbətləri cinslər arasında fərqlənmir və hətta daha az bölgələrdə kişi rekombinasiya nisbəti qadın nisbətlərini aşır. Buna baxmayaraq, qadınlarda daha yüksək rekombinasiya nisbətlərinin ümumi qaydası, arxa krossoverdə heterozigot F 1 heyvanı üçün cinsi uyğun olaraq seçərək məlumat istehsalını maksimum dərəcədə artırmaq üçün istifadə edilə bilər. Məsələn, əlaqə üçün ilkin dəlil tapmaq şansını artırmaq üçün F1 heyvanları olaraq kişiləri seçə bilərik.müəyyən bir bölgədə genetik xəritənin həllini maksimum dərəcədə artırmaq üçün dişilərdən istifadə etmək daha yaxşı olar. Bu mülahizələr daha çox Bölmə 9.4 -də müzakirə olunur.

7.2.3.3 Rekombinasiyalı qaynar nöqtələr

Bağlantı analizinin məhdudiyyətsiz gücünə ən ciddi zərbə, kiçik dəqiq təyin olunmuş genomik bölgələrdə rekombinasiya üçün minlərlə nəslin yazıldığı xaçların nəticələridir. Bu xaçlarda yaranan rekombinant xromosomlar DNT səviyyəsində araşdırıldıqda, krossover sahələrinin yayılmasının təsadüfi deyil (Steinmetz et al., 1987). Bunun əvəzinə, bir neçə kilobaz və ya daha az ölçülü çox kiçik "rekombinasiyalı qaynar nöqtələrdə" toplaşmağa meyllidirlər (Zimmerer və Passmore, 1991; Bryda və digərləri, 1992) Yığılmış məlumatlar bu kiçik qaynar nöqtələrin orta məsafələrdə Bu saytlarla məhdudlaşan bütün krossover hadisələrinin 90% və ya daha çoxu ilə bir -birindən ayrı bir neçə yüz kilobaz.

Siçanlarda rekombinasiyalı qaynar nöqtələrin tapılması təəccüblüdür, çünki əvvəllər Drosophiladaedilən və kilobaz analiz səviyyəsinə qədər fiziki məsafələr arasında mükəmməl bir uyğunluq göstərən çox yüksək qətnamə xəritələşdirmə tədqiqatlarından proqnozlaşdırılmamışdır (Kidd və digərləri, 1983). Beləliklə, bu genetik fenomen ?? genomik iz kimi (Bölmə 5.5) ?? məməlilərə xas ola bilər. Ancaq çapdan fərqli olaraq, müəyyən rekombinasiyalı qaynar nöqtələrin yerləri fərqli alt növlər arasında və hətta laboratoriya siçanlarının fərqli suşları arasında qorunmur.

Şəkil 7.5, əlaqə və fiziki xəritələr arasındakı əlaqənin qaynar nöqtəyə üstünlük verərək keçməsinin nəticələrini göstərir. Bu nümunədə, arxa krossoverdən 2000 nəsil, uydurma AFlokusları arasındakı rekombinasiya hadisələri üçün təhlil edildi . Bu lokuslar 1500 kb fiziki məsafə ilə ayrılır və nümunəmizdə 2000 övlad arasında 17 keçid hadisəsi (əlaqə xəritəsində qısa şaquli xətlərlə göstərilmişdir) müşahidə edilmişdir. 17 / 2.000 rekombinasiya tezliyi 0.85 cM əlaqə məsafəsinə çevrilir. Bu əlaqə məsafəsi, 2000 kb -dən 1 cM -ə qədər olan empirik olaraq təyin olunan ekvivalentdən proqnozlaşdırılan 0.75 cM -ə çox yaxındır. Ancaq AFarasındakı lokuslara daha çox baxdıqda, vəziyyət kəskin şəkildə dəyişir. BC20 kb ayrı fiziki xəritədə hər, lakin bir hotspot onların arasında regionda baş verir, çünki 0,4 sm ayrı əlaqələr xəritədə bir-birinə olan yerli. Təsadüfi keçid yerləri ilə 0.4 cM əlaqə dəyəri 800 kb fiziki məsafəni proqnozlaşdırardı. Qarşılıqlı vəziyyət, fiziki məsafəsi 400 kb olan bir-birindən ayrılmış, lakin 2000 nəsildə rekombinasiya göstərilməyən DElokusları üçün meydana gəlir . Bu vəziyyətdə təsadüfi keçid 100 kb -dan az bir fiziki məsafəni proqnozlaşdırardı.

Rekombinasiyalı qaynar nöqtələrin varlığına və nəticələrinə maddənin kvantlaşdırılmış təbiətinə bənzər şəkildə baxmaq olar. Aşağı qətnamə səviyyələrində aparılan təcrübələr üçün ?? məsələn, qram və ya santimorqan ölçülərində? həm maddənin, həm də krossover saytların paylanması davamlı görünür. Bununla birlikdə, çox yüksək qətnamə səviyyələrində, hər ikisinin kəsilmə xarakteri aydın olacaqdır. Praktik olaraq, siçan əlaqə xəritəsinin həllində qaynar nöqtələrin mənfi nəticələri yalnız analizin 0,2 cM səviyyəsindən aşağı düşdükdə özünü göstərməyə başlayacaq.

Bu günə qədər həyata keçirilmiş çox böyük nümunə əlaqəli tədqiqatların məhdud sayında, siçan genomunun qaynar nöqtəyə yönəldilmiş rekombinasiyanın üstünlük təşkil etdiyi hissəsini qiymətləndirmək mümkün deyil. Bundan əlavə, bəzi genomik bölgələrin Drosophiladakıkimi məhdudiyyətsiz rekombinasiyaya icazə verməsi hələ də mümkündür. Buna baxmayaraq, mövcud məlumatlar, genomun böyük bir hissəsi üçün, tək bir xaça əsaslanan əlaqələndirmə tədqiqatlarında əldə edilə bilən qətnamənin yuxarı həddinin olacağını göstərir. Bu həddə keçid sahələrinin sıxlığının təhlil edilən bölgədəki qaynar nöqtələrin sıxlığından keçdiyi bir nöqtədə çatacaqdır. Hal-hazırda mövcud olan məlumatlardan görünür ki, bu nöqtə ümumiyyətlə 0,2 cM və ya 400 kb-a uyğun gələn 500 meiotik hadisəyə çatmadan keçiləcəkdir. Bu məhdudiyyəti aradan qaldırmaq üçün istifadə oluna biləcək bir strategiya, hər birinin fərqli qaynar nöqtələr ilə əlaqəli olduğu, əlaqəsi olmayan müxtəlif cinsli tərəfdaşlarla bir neçə xaçdan əldə edilən məlumatları birləşdirməkdir. Bu yanaşma Bölmə 9.4 -də daha ətraflı müzakirə olunur.

7.2.3.4 Rekombinasiya tezlikləri müxtəlif xromosomal bölgələr arasında çox dəyişə bilər.

Daha əvvəl də qeyd edildiyi kimi, xromosomların telomerik hissələri daha çox mərkəzdə yerləşən xromosom bölgələrinə nisbətən DNT uzunluğuna görə daha yüksək rekombinasiya nisbətləri göstərir. Bununla birlikdə, hətta fərqli telomerik olmayan bölgələr arasında rekombinasiya nisbətlərində böyük dəyişikliklər var. Bəzi 1 mb bölgələr 2 cM və ya daha yüksək nisbətdə rekombinantlar istehsal edir, digər ekvivalent ölçülü bölgələr isə eyni cinsdən olan heyvanlarda yalnız 0.5 cM və ya daha az nisbətdə rekombinasiya edir. Bu dəyişiklik rekombinasiya nöqtələrinin sayı və sıxlığındakı fərqlərə görə ola bilər. Bundan əlavə, ayrı -ayrı qaynar nöqtələrin "gücü" rekombinogenlik baxımından bir saytdan digərinə fərqli ola bilər.Bu cür fərqlər, ayrı-ayrı qaynar nöqtələrdəki DNT ardıcıllığı və ya daha çox aralıqda çoxlu nöqtələri əhatə edən kromatinin quruluşu ilə təyin edilə bilər. Son dəyişən, qaynar nöqtələr arasındakı bölgələrdə rekombinasiyanın meydana gələ biləcəyi nisbətlərdə ümumiləşdirilmiş fərqlər ola bilər. Bu müxtəlif izahatları araşdırmaq üçün daha çox ampirik tədqiqatlar tələb olunacaq.

7.2.4 Siçan xəritələşdirmə tarixi

7.2.4.1 Klassik dövr

Əhəmiyyəti dərhal tanınmasa da, siçandakı əlaqənin ilk nümayişi 1915-ci ildə iyirminci əsrin böyük genetikçisi JBS Haldane (1915) tərəfindən nəşr olundu. Haldane'nin tapdığı şey, albino ( c) və çəhrayı gözlü seyreltmə ilə mutasiyalar arasında birləşmə sübutu idi ( p) Chr 7-də bir-birindən 15 cM aralıda yerləşdiyini bildiyimiz lokuslar. O vaxtdan bəri, siçanın keçid xəritəsi yaxın bir eksponensial sürətlə durmadan genişləndi. Siçan xəritəsindəki ilk 65 il ərzində bu genişlənmə bir anda bir yerdən baş verdi. Əvvəlcə hər bir yeni mutasiya digər fenotipik markerlər ilə bir növə çevrilməli idi. Sonra yeni mutasiyanın bu digər markerlərdən hər hansı biri ilə əlaqəli olub olmadığını müəyyən etmək üçün daha çox damazlıq aparıldı. Bu proses əvvəllər xəritələnmiş bir başqa markerlə əlaqə qurulana qədər müxtəlif fenotipik marker qrupları ilə təkrarlanmalı idi. Bu nöqtədə, daha zərif bir xəritə mövqeyi qurmaq üçün eyni əlaqə qrupundan olan əlavə fenotipik markerlərlə əlavə heyvandarlıq işləri aparıla bilər.

1941 -ci ildə Laboratoriya Siçanlarının Biologiyasında(Snell, 1941) nəşr olunan siçan genetik məlumatlarının ilk məcmuəsində, hər biri iki və ya üç lokusu olan yeddi əlaqə qrupuna yerləşdirilə bilən 24 müstəqil lokus siyahıya alındı. ; qalan doqquz lokusun bir-biri ilə və ya təsdiqlənmiş yeddi əlaqə qrupundan heç biri ilə əlaqəli olmadığı aşkar edilmişdir. 1966 -cıildə "Laborator Siçan Biologiyası"nın ikinci nəşri nəşr olunanda xəritələnmiş lokusların sayı 250 -yə çatdı və əlaqə qruplarının sayı 19 -a yüksəldi, baxmayaraq ki, dörd halda bunlara yalnız iki və ya üçü daxil idi. lokuslar (Yaşıl, 1966).

Laboratoriya Siçanının Genetik Variantları və Ştammlarının(Lyon və Searle, 1989) ikinci nəşrinin 1989 -cu il nəşriylə birlikdə, 965 lokus 20 rekombinasiya edən bütün xromosomlarda xəritələnmişdi. Bununla birlikdə, bu xəritənin əslində nəşrə hazırlandığı dövrdə də (təxminən 1987 -ci ilin sonlarında), hələ də xəritələnmiş lokusların böyük əksəriyyətinin geniş heyvandarlıq tədqiqatları yolu ilə bütün genom xəritəsinə əziyyətlə daxil edilmiş mutasiyalarla təyin olunduğu hallar belə idi. .

7.2.4.2 Orta əsrlər: rekombinant doğma suşlar

Tək lokusların xəritələndirilməsi üçün lazım olan vaxtın, səylərin və siçanların azaldılmasına yönəlmiş ilk əhəmiyyətli konseptual irəliləyiş, Jackson Laboratoriyasında Donald Bailey və Benjamin Taylor tərəfindən rekombinant genetik (qısaldılmış RI) suşlarının konseptualizasiyası və qurulması ilə gəldi (Bailey, 1971; Taylor , 1978; Bailey, 1981). Bölmə 9.2-də ətraflı şəkildə bəhs edildiyi kimi, bir sıra RI suşları, yeni cins suşları kontekstində iki fərqli damazlıq suşlarından olan homoloqlar arasındakı rekombinasiya hadisələrinin qorunub saxlanıldığı nümunələr toplusunu təmin edir. RI yanaşmasının gücü, analizlərin özləri uzun illər aralığında aparılsa da, lokusların eyni "xaç" içərisində bir-birinə nisbətən xəritələnməsidir. RI suşları mahiyyətcə əvvəlcədən hazırlanmış və ölməz olduğundan,yeni təyin olunmuş bir lokusun yazılması, yazma analizinin özü qədər vaxt tələb edir.

RI Xəritəçəkmə yanaşması nəzəri cəhətdən son dərəcə güclü olmasına baxmayaraq, ortaya çıxdıqdan sonrakı ilk onillikdə iki böyük problem olduğu üçün istifadəsi olduqca məhdud idi. Birincisi, analiz yalnız hər bir RI dəstini meydana gətirmək üçün istifadə olunan iki soylu valideyn suşunda alternativ allel olaraq mövcud olan lokuslarla mümkün idi. Bu, ümumi fenotipik təsirlərlə təyin olunan bir çox lokusun demək olar ki, hamısını istisna etdi. Belə lokuslardan yalnız bir ovuc ?? ilk növbədə palto rəngini təsir edənlər ?? müxtəlif cins suşları arasında polimorf idi. Əslində, əvvəlcədən birləşmiş DNT dövründə RI analizinə uyğun olan digər lokuslar şifrələnənlər idi: (1) spesifik ferment üçün işlənmiş nişasta jelləri üzərində fərqli miqrasiya edən bantlar olaraq görülən polimorfik fermentlər (allozimlər və ya izozimlər adlanır). təhlil edilən fəaliyyət (Womack, 1979);(2) kiçik histokompatiblik yerlərdə aşkar edilən immunoloji polimorfizmlər (Graff, 1978); və (3) xüsusi hazırlanmış "allo-antisera" ilə fərqlənə bilən digər polimorf hüceyrə səthi antijenləri (alloantigenlər və ya izoantigenlər adlanır) (Boyse və digərləri, 1968). Geriyə baxdıqda, RI suşlarının vaxtından əvvəl inkişaf etdirildiyi artıq aydındır; siçan genetikasında gücü və faydası yalnız indi ?? 1990-cı illərdə? tamamən açılmaq.siçan genetikasında gücü və faydası yalnız indi ?? 1990 -cı illərdə ?? tamamən açılmaq.siçan genetikasında onların gücü və faydası yalnız indi? 1990 -cı illərdə ?? tam açılır.

7.2.4.3 DNT markerləri və Xəritəçəkmə paneli dövrü

1980 -ci illərdə baş verən iki hadisə, tamamilə DNT marker lokuslarına əsaslanan bütün bir genom siçan xəritəsinin ilkin inkişafına imkan verdi. Birinci hadisə, siçan genomundan və bütün digər orqanizmlərdən DNT klonlarının alınması texnologiyasının qloballaşması idi. DNT klonlama üsulları 1970-ci illər ərzində inkişaf etdirilsə də, ABŞ-da və digər ölkələrdə sərt qaydalar onların siçan kimi məməli növlərinə geniş tətbiq edilməsinin qarşısını aldı (Watson and Tooze, 1981). Bu qaydalar 1980-ci illərin ilk illərində geniş miqyasda azaldıldı ki, tipik bioloji tədqiqat müəssisələrindəki tədqiqatçılar siçanların genlərini klonlamağa və xarakterizə etməyə başlaya bilsinlər.Klonlama texnologiyasının qloballaşması, 1982-ci ildə rəsmi olaraq Cold Spring Harbor Laboratoriyasından ilk yüksək detallı klonlama təlimatının nəşri ilə çox sürətləndi.Molekulyar Klonlaşdırma: Bir Laboratoriya Təlimatı, lakin qeyri -rəsmi olaraq "İncil" olaraq bilinir (Maniatis et al., 1982). 52

1980 -ci illərdə siçan genomu boyunca lokuslardan DNT klonları sürətli bir şəkildə bərpa olunsa da, onların bağlantı xəritəsində ümumi istifadəsi sadə deyildi. Klonlanmış lokusların xəritələnməsi üçün o vaxt mövcud olan yeganə texnika məhdudlaşdırma parçası uzunluğu polimorfizmlərinin (RFLP) yazılması idi. Təəssüf ki, bu kitabın əvvəlində müzakirə edildiyi kimi (Bölmələr 2.3 və 3.2), ənənəvi cins damazlıq suşların ortaq mənşəyi, aralarında RFLP -lərin ən çox klonlanmış lokuslarını müəyyən etməyi çətinləşdirdi, hətta mümkün olmasa da.

Xəritədəki lojem yeni bir molekulyar texnikanın inkişafı ilə deyil, əksinə yeni bir genetik yanaşmanın inkişafı ilə pozuldu. Bu 1980 -ci illərdə siçan xəritələşdirmə baxımından ikinci əhəmiyyətli hadisə idi? növlərarası backcrossun tətbiqi. François Bonhomme və fransız həmkarları iki fərqli siçan növünün olduğunu kəşf etdilər? M. musculusM. spretus?? məhsuldar F 1 dişi hibridləri yaratmaq üçün laboratoriyada birlikdə yetişdirilə bilər (Bonhomme və digərləri, 1978). Bu iki Musuayıran üç milyon il ilənövlər (Bölmə 2.3), baza cüt əvəzləmələri, sınaqdan keçirilmiş demək olar ki, hər bir DNT probu üçün RFLP -lərin sürətlə təyin oluna biləcəyi nöqtəyə qədər yığılmışdır. Beləliklə, növlərarası bir super-heterozigotlu F 1 dişi ilə ana suşlarından birinin ardınca keçərək, RFLP analizindən istifadə edərək DNT klonları ilə təyin olunan lokusların böyük əksəriyyətinin ayrılmasını izləmək mümkün olur.

"Spretus backcross" bir sıra RI suşları ilə eyni şəkildə əbədiləşdirilə bilməməsinə baxmayaraq, backcross nəsillərinin hər biri yüzlərlə DNT zondu ilə RFLP analizləri üçün kifayət edən bir DNT miqdarına çevrilə bilər. Əslində, klassik üç lokuslu arxa keçiddən bir neçə yüz lokus arxa keçidə keçmək mümkün oldu. Bundan əlavə, qurulmuş "Xəritəçəkmə panelinin" üzvlərini (DNT nümunələri tükənənə qədər) araşdırmaq üçün yeni DNT probları istifadə edildikcə lokusların sayı artmağa davam edə bilər. spretusbackcross, siçan genomunun DNT markerlərinə əsaslanan ilk tam əlaqə xəritəsini təmin etdiyi və DNT səviyyəsində müəyyən edilmiş hər hansı bir yeni lokusu sürətlə xəritələşdirmək üçün istifadə edilə bilən Xəritəçəkmə panelləri təqdim etdiyi üçün siçan genetikasının öyrənilməsində inqilab etdi.

7.2.4.4 Mikrosatellitlər

Genetik analizdəki ən son irəliləyiş, yeni növ xaçların inkişafından deyil, son dərəcə polimorfik olan və minimal miqdarda nümunə olan çoxlu heyvanlara sürətlə yazıla bilən PCR əsaslı DNT markerlərinin kəşfindən və istifadəsindən irəli gəlir. material. Bu güclü yeni markerlər? xüsusilə mikrosatellites ?? spretus backcrossüçün zəruri ehtiyacları xeyli azaltmış və hörmətli RI suşlarının faydasına yeni bir həyat vermişlər. Ən əsası, məhdud mənbələrə sahib olan ayrı-ayrı müstəntiqlərin mutant genlərin və ya mürəkkəb xəstəlik xüsusiyyətlərinin müstəqil, inkişaf etmiş xəritələşdirmə təhlillərini aparması artıq mümkündür. Parisdəki Pasteur İnstitutundan Filip Avnerin dediyi kimi: "1980 -ci illər Mus spretusununon ili olsaydı?? məhdudlaşdırıcı fraqment uzunluğu polimorfizmləri ilə birlikdə istifadəsi siçan bağlantı analizində inqilab etdi və siçanı genom xəritələşdirmə üçün olduqca təsirli bir sistem halına gətirdi? 1990-cı illərin əvvəlləri mikrosatellin illəri kimi görünür "(Avner, 1991). Mikrosatellitlər və digər PCR tipli polimorf lokuslar Bölmə 8.3-də uzun müddət müzakirə olunur.